样本获取

从患者手术切除的肿瘤组织或活检样本中获取新鲜的结直肠癌组织，应确保样本具有足够的活性和代表性。

组织处理

将获取的组织在无菌条件下进行处理，去除坏死组织和血液等杂质，然后用酶如胶原酶、胰蛋白酶等进行消化，将其分解成单细胞或小细胞团。

细胞筛选与培养

过滤：通过细胞滤网过滤消化后的细胞悬液，去除大的组织碎片，得到相对纯净的细胞悬液。

接种：将筛选后的细胞接种在含有特定培养基的培养板或培养皿中。培养基通常包含生长因子、细胞因子、基质成分等，如盛合瑞生物的结直肠癌类器官完全培养基，以提供细胞生长和形成类器官所需的营养和信号支持。

环境控制：培养环境一般需要保持合适的温度（如 37°C）、二氧化碳浓度（如 5%）和湿度，可使用 CO₂培养箱等设备来维持稳定的培养条件。

类器官形成与传代

形成：在适宜的培养条件下，细胞逐渐聚集并形成类器官结构，这个过程可能需要数天至数周的时间，期间需要定期观察类器官的生长情况。

传代：当类器官生长到一定程度，可以进行传代培养，以维持类器官的生长和扩增。传代时，通常需要先将类器官消化成单细胞或小细胞团，再进行接种和培养。

鉴定与检测

通过形态学观察、免疫组化、基因检测等方法对培养的类器官进行鉴定，确认其与结直肠癌的特征相符，例如检测癌细胞标志物的表达、基因突变情况等。