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肿瘤类器官培养基配方
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赛奥维度

时间 : 2025-02-15 09:23 浏览量 : 2

肿瘤类器官培养基的配方会根据具体的肿瘤类型而有所不同。以下是一些常见肿瘤类器官的培养基配方及其关键组分:


一、胃癌类器官培养基

为了成功培养胃癌类器官,常用的培养基配方包括ADMEM/F12培养基作为基础,并添加多种细胞因子。例如,Vlachogiannis等人在其研究中使用了改良的DMEM/F12基础培养基,并添加了以下组分:


1x B27 additive

1x N2 additive

0.01% BSA

2 mM L-Glutamine

100 units/ml 青霉素-链霉素

EGF(表皮生长因子)

Noggin

R-Spondin 1(Wnt信号通路激活剂)

FGF-10(成纤维细胞生长因子10)


二、结直肠癌类器官培养基

结直肠癌类器官的培养通常使用改良的DMEM/F12培养基作为基础,并添加特定的生长因子和抑制剂。一个典型的配方包括:


基础培养基:改良的DMEM/F12培养基,添加青霉素-链霉素、10 mM HEPES和Glutamax。

人肠干细胞培养基:将Wnt条件培养基、R-Spondin 1条件培养基、Noggin条件培养基和基础培养基按照一定比例混合(如50%、20%、10%和20%),然后加入其他因子,如1x B27、n-Acetyl Cysteine、Nicotinamide、人EGF、Gastrin、A83-01、SB202190、Prostaglandine E2和Primocin。


三、肝癌类器官培养基

肝癌类器官的培养需要更加细致的培养基配方,以支持不同类型的肝癌细胞生长。例如,Broutier等人在其研究中使用了以下配方:


基础培养基:改良的DMEM/F12培养基,添加青霉素-链霉素、Glutamax、HEPES和B27添加剂。

经典人肝类器官分离培养基:将Wnt条件培养基、R-Spondin 1条件培养基和基础培养基按照一定比例混合(如30%、10%和70%),然后加入其他因子,如N2添加剂、n-Acetyl Cysteine、Nicotinamide、重组人Gastrin I、重组人EGF、重组人FGF10、重组人HGF、Noggin、A83-01、Forskolin和Y27632。

肿瘤细胞特异性分离培养基:在经典人肝类器官分离培养基的基础上添加地塞米松。

肝癌类器官培养基:基础培养基中添加R-Spondin 1条件培养基、N2添加剂、n-Acetyl Cysteine、Nicotinamide、重组人Gastrin I、重组人EGF、重组人FGF10、重组人HGF、A83-01和Forskolin。


四、乳腺癌类器官培养基

乳腺癌类器官的培养基配方与其他肿瘤略有不同。Seino等人在其研究中发现,Neuregulin 1与乳腺发育和肿瘤发生有关,将其添加到培养基中可以维持类器官的有效再生和长期增殖。此外,EGF对乳腺癌类器官培养具有双重作用,高浓度促进细胞增殖但可能导致类器官解体,而低浓度则有利于类器官的形成和维持。一个典型的乳腺癌类器官培养基配方可能包括基础培养基(如DMEM/F12)和上述关键因子的适当组合。


五、通用注意事项

在制备肿瘤类器官培养基时,应确保所有组分的新鲜度和无菌性。

培养基的pH值和渗透压也需要控制在适宜的范围内,以支持肿瘤类器官的生长和分化。

不同类型的肿瘤类器官可能对培养基中的某些组分有不同的需求,因此在实际应用中可能需要根据具体情况进行调整和优化。


综上所述,肿瘤类器官培养基的配方因肿瘤类型而异,但通常都包括基础培养基和多种生长因子、抑制剂的组合。在实际应用中,需要根据具体的研究目的和实验条件进行选择和调整。


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