细胞代谢方面
代谢产物积累:卵巢癌细胞代谢旺盛,会产生大量乳酸等酸性代谢产物。这些产物在培养基中积累,会使培养基 pH 值下降,酚红指示剂变色,导致培养基发黄。当细胞接种密度过高,细胞数量多,代谢产物的生成速度就会更快,更易引起培养基发黄。
二氧化碳积累:细胞呼吸作用产生二氧化碳,二氧化碳溶解在培养基中形成碳酸,降低培养基的 pH 值,促使培养基发黄。如果培养箱中二氧化碳浓度设置不合理,过高的二氧化碳进入培养基,也会加重这种情况。
微生物污染方面
细菌污染:如大肠杆菌、葡萄球菌等污染培养基,细菌在培养基中快速繁殖,利用其中的营养物质进行代谢,会产生大量酸性代谢产物,使培养基 pH 值降低而发黄,通常还伴有培养基浑浊、有异味等现象。
真菌污染:如念珠菌等真菌污染,其生长过程中消耗营养成分并产生代谢产物,也可能导致培养基发黄,可能会观察到培养基中有白色或浅黄色的菌丝体,培养基也可能出现浑浊。
支原体污染:支原体污染较为隐匿,污染后细胞病变不明显,但会影响细胞代谢,使培养基逐渐变黄,且支原体不能用过滤的办法除去,在培养约两周左右细胞可能基本全部死亡。
培养基成分方面
酚红氧化:培养基中的酚红具有一定的还原性,在接触空气、光照或某些化学物质时,容易被氧化,从红色逐渐向黄色转变,从而使培养基看起来发黄,尤其是培养基与空气接触较多的情况下。
营养物质消耗:卵巢癌类器官生长会消耗培养基中的葡萄糖、氨基酸等营养物质,当营养物质被大量消耗后,培养基的成分比例发生变化,可能会影响其颜色。同时,细胞代谢产生的废物和其他代谢产物在培养基中积累,也可能与培养基中的成分发生反应,导致培养基发黄。
培养环境方面
温度波动:培养箱温度过高,会加速细胞代谢和微生物的生长繁殖,使细胞代谢产物和微生物代谢产物生成速度加快,加快培养基颜色变化。温度过低则可能影响细胞对营养物质的吸收和代谢,导致细胞内代谢紊乱,产生过多的酸性代谢产物排出到培养基中,引起培养基发黄。
pH 值异常:培养箱中二氧化碳浓度调节不当等因素,会导致培养基 pH 值异常波动。pH 值下降时,培养基中的酚红指示剂就会使培养基呈现黄色。